●DUS田間表型鑒定是對申請保護的植物新品種進行特異性、一致性和穩(wěn)定性的栽培鑒定試驗或室內(nèi)分析測試的過程。測試方法是將申請品種與近似品種在相同的生長條件下，從植物的種子、幼苗、開花期、成熟期等各個階段對多個質(zhì)量性狀、數(shù)量性狀及抗病性等作出觀察記載，并與近似品種進行結(jié)果比較。
●DNA室內(nèi)基因型鑒定是一項生物學檢測技術(shù)，以玉米為例，玉米有總數(shù)約為30億個堿基對的DNA，每個品種的DNA都不完全相同，品種與品種之間不同的堿基對數(shù)目達幾百萬之多，因此通過分子生物學方法顯示的DNA圖譜也有差異，由此可以識別不同的品種。
如果將100個品種撕掉標簽和包裝，通過種子形態(tài)或者田間種植進行形態(tài)觀察讓它們一一對號入座，辨別出分別是什么品種，我想幾乎沒有人能夠做到，那成千上萬個品種就更不可能做到了。但利用DNA指紋技術(shù)識別這些品種就輕而易舉了，一天就可以完成?！斑@就是DNA鑒定技術(shù)既準確可靠，又經(jīng)濟快捷的優(yōu)勢?！北本┦修r(nóng)林科學院玉米研究中心主任趙久然的信心來自于他們團隊20余年持之以恒的關(guān)于玉米標準DNA技術(shù)的研究與應用。
農(nóng)業(yè)部辦公廳日前發(fā)布了《農(nóng)作物品種DNA身份鑒定體系構(gòu)建實施方案》，明確了農(nóng)作物品種DNA身份鑒定體系構(gòu)建的重要意義和發(fā)展方向。
且說快和準
難以想象僅2014年一年時間里，玉米中心做過的DNA指紋檢測鑒定樣本量達1萬多份?！罢３绦蚴?個工作日之內(nèi)出結(jié)果，加急樣品48小時內(nèi)出結(jié)果?！睓z測中心王鳳格博士說，“無論是已審定的、參加過區(qū)試的，還是提交品種權(quán)保護的品種，凡是在玉米中心做過檢測的，其‘指紋’和痕跡就會永久留存了。目前，這個標準指數(shù)庫已經(jīng)保存了2萬多個玉米標準DNA指紋信息，未來還會進一步擴容?！?/span>
人類DNA鑒定技術(shù)的應用也有近20年了，通過人的DNA檢測可以進行親子鑒定，更可以用于刑事偵查中的DNA比對，已經(jīng)成為公安機關(guān)有效的破案利器。作物與人都屬于生物，遺傳信息載體都是DNA，很多技術(shù)是相通的，但也有不同之處。趙久然解釋，在人類DNA檢測結(jié)果判別上，引入最大似然率概念，就是說兩個樣本的DNA鑒定結(jié)果完全一樣，也存在著極小概率不是同一個人的可能性。而在玉米品種判定中，沒有使用“最大似然率”這個概念，采用了“高度近似”這個概念。就是說如果兩個品種的DNA鑒定結(jié)果相同，其判定結(jié)論是“相同或高度近似”，有可能不同，但即使有些許差異，這種差異也是很小的，頂多屬于派生品種范疇。如果把兩個品種種在一起，連育種者自己都分不清哪個是他育成的品種，還能說那是一個新品種嗎？“同”是相對的，“不同”是絕對的，沒有兩個絕對相同完全一樣的事物，關(guān)鍵是確定和把握好尺度。
遏制“仿冒套”
有人說“市場上至少1/3的種子是假冒的?！庇腥烁锌靶缕贩N培育六七年，仿冒才幾天?！睒I(yè)內(nèi)認為“仿冒套”傷的是種業(yè)創(chuàng)新力，呼吁通過DNA身份鑒定這項技術(shù)支撐，能夠?qū)Α胺旅疤住逼鸬蕉糁谱饔?，鼓勵真正的品種創(chuàng)新，引導市場走向自律。
人靠相貌等可以辨別，而DNA鑒定是最終途徑。農(nóng)作物也是一樣，由于少數(shù)具備高產(chǎn)、廣適、抗病等特性的親本被集中應用，在原品種基礎上稍作修改的派生品種越來越多，品種間的遺傳差異是肉眼所難以辨別的，這時就需要DNA來鑒定其身份了。
例如山東濟南中院受理先鋒公司告某公司生產(chǎn)的“費玉3號”侵犯“先玉335”品種權(quán)案，經(jīng)玉米中心DNA檢測，“費玉3號”與農(nóng)業(yè)部“先玉335”標準樣品比較，在40個位點上位點差異為1，被告未提出有利證據(jù)證明不是同一品種，判決被告停止侵權(quán)并賠償原告經(jīng)濟損失。
“依據(jù)玉米DNA指紋檢測標準，如果差異位點數(shù)≥2，證明為不同品種；差異位點數(shù)≤1，則證明品種相同或高度近似?！壁w久然說，“這其中是留有框量的，但是基本不給‘仿冒套’鉆空子的余地。”
不是隨便“抓一把”
玉米有30億個堿基對，憑什么僅靠目前的40個位點檢測結(jié)果，就能判斷清楚？
對此，趙久然說，這40個位點不是隨便“抓一把”。2001年起確立了核心引物組合法的品種鑒定方案，從2001年~2005年，經(jīng)過4年多系統(tǒng)篩選和重新設計，形成了一套共40個位點適于玉米品種鑒定的SSR（簡單重復序列）引物組合，這些位點都存在等位基因，在不同品種間存在著明確的差異，這些差異組合就可以組合出巨大的天文數(shù)字。在此基礎上研制出國內(nèi)首個和唯一的適合玉米品種真實性檢測的的DNA指紋復合擴增試劑盒專利產(chǎn)品。利用這套引物，僅玉米中心就開展了近5萬份樣品的真實性檢測，充分檢驗了40個引物的有效性。
SNP（單核苷酸多態(tài)性）技術(shù)是否就此取代了SSR技術(shù)在DNA身份鑒定測試中的應用？
“實際上是推廣一代，研究一代?！壁w久然說，每種標記技術(shù)都在特定時期內(nèi)對品種檢測工作發(fā)揮一定作用，其中SSR和SNP由于均為共顯性遺傳、染色體定位清楚、具有高通量自動化的潛力而被UPOV的BMT分子測試指南推薦作為品種鑒定和數(shù)據(jù)庫構(gòu)建的優(yōu)選標記。趙久然認為，兩種標記技術(shù)均是比較適合品種指紋分析的標記，其中SSR標記可以滿足大部分樣品快速低成本的進行真實性檢測的要求，而SNP標記可以對其中鑒別困難的派生品種進行精細鑒別，兩種標記技術(shù)各自具備優(yōu)缺點，可優(yōu)勢互補，未來將長期并存應用。
